Uso
Medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias en base
a la capacidad de usar citrato como única fuente de carbono y
energía.
Fundamento
En el medio de cultivo, el fosfato monoamónico es la única fuente
de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de carbono.
Ambos componentes son necesarios para el desarrollo bacteriano.
Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es
cofactor enzimático. El cloruro de sodio mantiene el balance osmó-
tico, el azul de bromotimol es el indicador de pH, que vira al color
azul en medio alcalino y el agar es el agente solidificante.
El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos
capaces de utilizar citrato como única fuente de carbono usan
sales de amonio como única fuente de nitrógeno, con la consiguiente
producción de alcalinidad.
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras
de citrato permeasa, a través del ciclo del ácido tricarboxílico.
El desdoblamiento del citrato genera progresivamente, oxalacetato
y piruvato. Este último, en presencia de un medio alcalino, da origen
a ácidos orgánicos que al ser utilizados como fuente de carbono,
producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces
vira al azul y esto es indicativo de la producción de citrato permeasa.
Contenido y composición
Código B0213205: envase x 100 g.
Código B0213206: envase x 500 g.
Simmons Citrato Agar
FÓRMULA (en gramos por litro)
Citrato de sodio...................................................................................................2.0
Cloruro de sodio..................................................................................................5.0
Fosfato dipotásico...............................................................................................1.0.
Fosfato monoamónico.........................................................................................1.0.
Sulfato de magnesio............................................................................................0.2.
Azul de bromotimol.................................................................................. ...........0.08.
Agar.....................................................................................................................15.0.
pH final: 6.9 ± 0.2
Instrucciones
1.- Se pesó 1.21 gramos del agar.
2.- Diluir en 100ml de agua en el matraz y agitar hasta disolver.
3.- Colocar en la parrilla para calentar, esto sin dejar de agitar.
4.- Esperar a que hierva e inmediatamente retirar de la parrilla.
5.- Servir en tubo o en cajas de petri.
6.- Se procede a incubar la bacteria.
Características del producto
Medio de cultivo deshidratado: color amarillo-verdoso, homogéneo,
libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color verde.
Almacenamiento
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Procedimiento
-Siembra
Estriar la superficie del medio de cultivo.
-Incubación
En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24-72 horas.
Algunos microorganismos pueden requerir hasta 7 días de incubación.
Interpretación de los resultados
- Positivo: crecimiento bacteriano con un intenso color azul en el
pico de flauta.
- Negativo: ausencia de crecimiento y permanencia del color verde
del medio de cultivo.
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